伟禾分子小课堂三---ABO血型正反定型不一致原因三两知

ABO血型系统是人类认识最早的血型系统，其在临床输血、法医学鉴定、器官移植等领域均有重要的临床意义。因此，为确保输血安全，在血清学技术中要求使用正反定型方法来保证ABO血型鉴定的正确性。根据红细胞表面有无 A、B抗原及血清中有无抗A、抗B抗体可将 ABO血型分为 A 型、B型、AB型、O 型。红细胞上A、B抗原的异常表达会导致ABO亚型的产生。正定型（查抗原）和反定型（查抗体），分别是检测红细胞上有无相应的A抗原和B抗原以及血清中有无相应的抗体。正反定型的结果相互参照才能确保ABO血型鉴定的正确性。

目前的鉴定方法主要有微柱凝胶法和试管法，其中试管法是血型鉴定的“金标准”。实验室出现ABO正反定型不相符的样本通常可以被追踪，可以是被检者自身ABO血型抗原或抗体存在问题，也有可能是人为操作因素或试剂质量的各方原因导致。现排除人员操作及试剂质量问题就ABO正反定型不符原因做出总结：

1、ABO亚型

ABO亚型在血清学试验中是导致ABO正反向定型不符的主要原因。区分ABO亚型，可根据抗-A、抗-A1、抗-B、抗-H和抗-AB的凝集程度，以及通过自身对照的凝集程度、吸收放散实验来加以判断，有条件者可采用DNA测序和家系调查予以进一步确认。

典型案例：来源于武汉血液中心

参考文献：瞿珍，何鸣镝，赵磊，等. 1例B(A)亚型血型鉴定及分析【J】.微循环学，2021，31（3）：63-66.

     样本背景：采用全自动血型分析仪（B型）与纸片法初筛血型（AB型）不一致，经试管法血清学分析为B(A)亚型，且正反定型不相符，后经基因测序对该样本的1-7外显子检测，其中基因测序使用的引物、扩增条件、测序工作均由江苏伟禾生物科技有限公司负责完成，具体基因检测结果如下：

2、ABO血型抗体的量不足或丢失

    由于婴儿出生时Ig-M ABO是逐渐合成增多的，因此在婴儿早期经常会因为抗体不足而致常规法的血型鉴定不一致。另外一些肿瘤疾病的患者也会因为免疫功能的改变而导致抗体减弱和缺乏。如白血病患者红细胞的A抗原、B抗原减弱与标准血清会形成弱凝集，从而造成血型鉴定困难。

3、冷凝集素增高引起的红细胞自凝

    冷凝集素增高引起的红细胞凝集，低倍镜下可见到簇团状红细胞堆积，很难和真凝集相鉴别。在一些病理条件下，如自身免疫性溶血性贫血、病毒性肺炎、再生障碍性贫血恶性变、红斑狼疮等患者血清中易出现病理性自身冷抗体，常会造成ABO正定型和反定型出现全凝集，而无法鉴定血液样本的ABO血型。

4、不规则抗体或同种抗体

导致正反定型不符的不规则抗体是指ABO血型系统以外的血型抗体，这类抗体不同于ABO的血型系统特地，主要经过输血或妊娠等免疫刺激产生。而同种抗体主要有Rh、MN、P等血型系统的抗体，这类正反向定型不相符的样本除了可以应用筛选细胞和谱细胞加做抗体筛选和鉴定，也可以应用伟禾生物的人类红细胞基因分型检测试剂盒对33种红细胞抗原或表型进行定性检测，具体包含的血型系统如下表所示：

红细胞血型抗原基因的检测不但可以用于新生儿溶血病的筛查，还可以广泛用于献血员的人类红细胞血型基因筛查，用于血型基因电子交叉配血，减少因稀有血型不合引起的输血反应，有效提高输血安全，对实现精准安全输血有重要的意义。

在ABO血型鉴定中，正反定型不相符的原因比较复杂，同时会有多种因素参与其中。但准确鉴定血型对于确保临床输血安全具有重要意义。当出现正反定型不相符的血型鉴定时，需要分析相关原因，并将传统的血清学方法与分子生物学相结合，伟禾生物的人类红细胞基因分型检测试剂盒及各具体血型系统的外显子测序、家系调查等相关检测是辅助输血安全的有效基因手段。系统全面地利用不同手段对红细胞加以分析，才能够提高鉴定准确率，确保安全输血。

精准输血，选择先行，基因诊断，伟禾相伴！！！